乙型肝炎病毒核酸DNA定量检测与标志物酶免检测的相关性分析

ｉｎａ　Ｍｅｄｉ中国医药指南２０１０年１１月第８巷第３１期　Ｇｕｉｄｅ　ｏｆＣｈ！　！！　！　！！　！　：　！：　！　！：　参考文献　实验研究Ｉ　３３　据以上试验可以看出，复方丹参注射液与异丙肾上腺素合用在　增加离体豚鼠冠状动脉流量的方面发挥了增强作用。二者的混合液　体的作用超出了两者单独使用时简单相加的数量和。离体心脏实验　从一定程度上可以反映在体心脏的功能。如果将该方法应用于活体　［１］鲍启德，刘明军，石国梁等．复方丹参注射液治疗急性胰腺炎的　作用观察［Ｊ１．临床医学，２００８，２８（９）：２８—２９．　［２］胡昌乐．复方丹参注射液在流行性出血热治疗中越期作用的临　床观察［ＪＪ．新中医，１９８９，２１（２）：２７—２８．　动物仍能发挥良好作用，那么两者的合用就会为高血压、心绞痛、　肺心病、慢性心功能不全的治疗带来很大的帮助，为临床的合理用　药提供依据。根据两药的浓度比例可以考虑将两药制成复方制剂方　便应用。　［３１杨为民，张六一，王滟华等．复方血竭胶囊对离体豚鼠心脏冠脉　流量的影响［Ｊ］．昆明医学院学报，２００４，２５（２）：２５—２７．　［４］邹莉波．药理学实验［Ｍ】．北京：中国医药科技出版社，２００７．　乙型肝炎病毒核酸ＤＮＡ定量检测与标志物酶免检测的相关性分析　周　洪　【摘要】目的探讨乙型肝炎病毒各标志物与乙型肝炎病毒核酸（ＤＮＡ）之间的关系，为乙型肝炎病毒，临床检测和患者疗效观察的监测提　出检测方法学的建议。方法对１３４例乙型肝炎患者血清用科华酶免试剂作ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｅＡｂ、Ｐｒｅ—Ｓ１四项检测，同时用中山达安　ＤＡ５７００基因扩增仪和试剂做乙型肝炎病毒ＤＮＡ核酸扩增定量检测，按乙型肝炎病毒ＤＮＡ核酸定量检测扩增数量级分组，每一级为一　组，共分６组，然后与科华酶免试剂的ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｅＡｂ、Ｐｒｅ—Ｓ１四项检测结果分别作统计学分析。结果１３４例乙型肝炎病毒患　者血清ＤＮＡ核酸扩增＜１×１０　有３４例，＞１×１０　有１００例，阳性率７４．６％；各组分别与ＤＮＡ＜ｌ×１０　组比较，ＤＮＡ扩增项ＤＮＡ＞　１　ｘ　１０　的各组有极显著性差异（尸＜０．０１）；ＨｂｓＡｇ项各组均无显著性差异　＞０．０５）；ＨＢｅＡｇ项、ＨＢｅＡｂ项、Ｐｒｅ—Ｓ项ＤＮＡ＞１×１０。　组和ＤＮＡ＞１　Ｘ　１０　组有极显著性差异　＜０．０１），其余各组无显著性差异（尸＞０．Ｏ５）。各项之间作相关性分析结果为乙型肝炎ＤＮＡ　检测项与ＨＢｓＡｇ项（ｒ＝０　ｌ５１７，Ｐ＞０．０５）无相关性；ＤＮＡ检测项与ＨＢｅＡｇ、ＨＢｅＡｂ、Ｐｒｅ—Ｓｌ相关性分别为（ｒ＝０．７８５２，／－＝一０．６１４３，　ｔ＝０．６２６０；Ｐ均＜Ｏ．０５），有相关性。结论乙型肝炎病毒核酸ＤＮＡ定量检测项各组之间存在显著性差异；乙型肝炎病毒核酸ＤＮＡ载量＞　１　Ｘ　１０　以上组与ＨｂｅＡｇ、ＨＢｅＡｂ、Ｐｒｅ—ＳＩ有相关性。　【关键词】乙型肝炎病毒；ＤＮＡ检测；酶免标志物；诊断　中图分类号：Ｒ５１２．６＋２　文献标识码：Ｂ　文章编号：１６７１－８１　９４（２０１０）３１－００３３－０２　对１　３４例血清标本分别进行ＨＢＶ　ＤＮＡ基因扩增（荧光定量ＰＣＲ　法）和酶免标志物ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｅＡｂ、Ｐｒｅ—Ｓ１四项检测。以　中国是乙型肝炎病毒感染率较高的国家，已知的传播途径有多　种　。］。乙型肝炎病毒治疗周期较长，病毒对药物也存在耐受性，乙型　病毒肝炎如果治疗不规范、及时和彻底，可以引起肝硬化、转化为慢　性肝肝纤维化、肝癌的可能。乙型肝炎病毒患者的诊断、治疗、疗效　观察离不开对病毒的检查。现目前大多（尤其在区县级医疗机构）首　选乙型肝炎病毒标志物酶免五项（两对半）测定，病毒标志物酶免测　定不能直接真实地反应体内乙型肝炎病毒含量情况，乙型肝炎病毒核　酸ＤＮＡ定量测定才能直接反应乙型肝炎病毒存在、活动性复制及具传　染性的可靠指标　ｌ。乙型肝炎病毒核酸ＤＮＡ定量检测与乙型肝炎病毒　标志物酶免检测不同模式之间的相关性评价已有文献报道　】，本实验　ＨＢＶ　ＤＮＡ基因扩增数量级分组：ＤＮＡ＜１×１０　为Ａ组，１　Ｘ　１０　－１×１０　为Ｂ组、１　Ｘ　１０４　１×１０　为Ｃ组、１　Ｘ　１０５　１×１０　Ｄ组、１　Ｘ　１０６　１　Ｘ　１０　为　Ｅ组、＞１×１０。为Ｆ组。ＨＢＶ　ＤＮＡ基因扩增数取对数值表示，其他项　值为ｓ／ｃｏ值。　１．４统计学处理　采用ＳＡＳ　６．１２版统计学软件；ＨＢＶ　ＤＮＡ基因扩增数取对数值，　ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、ＨＢｅＡｂ、Ｐｒｅ—Ｓ１取“ｓ／ｃｏ”值，以　－４－ｓ表示，行每　组各项分别与Ａ组比较进行ｔ检验（表１）；￣ｑＪＨＢＶ　ＤＮＡ项各组分别与　其他项各组进行相关性分析。　以核酸ＤＮＡ扩增量级分组，不以组合模式分析结果，而分别以ＨＢｓＡｇ　（ｓ／ｃｏ）、ＨＢｅＡｇ（ｓ／ｃｏ）、ＨＢｅＡｂ（ｓ／ｃｏ）、Ｐｒｅ—Ｓ１（ｓ／ｃｏ）单独分析　２结果　各项之间的关系，希望能为乙型肝炎患者、临床提供更多的、有价值　的信息。现将１３４例乙型肝炎患者同时作乙型肝炎病毒核酸ＤＮＡ定量　检测和病毒标志物酶免检测的相关性分析报道如下。　１资料与方法　１．１检测对象　２．１　１３４例乙型肝炎ＨＢｓＡｇ￣性血清标本，ＨＢＶ　ＤＮＡ＞１×１０　有１００　例，阳性率７４．６％。　２＿２　ＨＢＶ　ＤＮＡ各组别与ＤＮＡ＜１×１０　比较有极显著性差异，Ｐ＜Ｏ．０１。　２．３标志物ＨＢｓＡｇ酶免检测各组无显著性差异Ｐ＞０．０５。　２．４　ＨＢｅＡｇ、ＨＢｅＡｂ和Ｐｒｅ—Ｓ１各项ＨＢＶ　ＤＮＡ＜１　Ｘ　１０　以下各组无显　著性差异，ＨＢＶ　ＤＮＡ＞ｌ×１０　以上各组有显著性或极显著性差异Ｐ　＜０．０ｌ或Ｐ＜０．０５。　随机留取重庆市渝北区人民医院检验科乙型肝炎病毒标志物检测　ＨＢｓＡｇ阳性患者标本１３４例。　１．２仪器及试剂　中山达安ＤＡ７６００基因扩增仪，中山达安ＨＢＶ核酸ＤＮＡ扩增试　剂；上海科华实业公司乙型肝炎病毒标志物检测酶免两对半试剂。　１＿３方法　２．５　ＨＢＶＤＮＡＮ与ＨＢｓＡｇ（ｓ／ｃｏ）不相关　．０９１；ＨＢＶＤＮＡ值＜ｌ×ｌ０５以　下组与ＨＢｅＡｇ（ｓ／ｃｏ），ＨＢｅＡｂ（ｓ／ｃｏ）、Ｐｒｅ—Ｓ１不相关ｒ＜０．１００｝ＨＢＶ　重庆市渝北区人民医院检验科（４０１　１　２０）　３４　Ｉ临床研究　中国医药指南２０１０年１１月第８卷第３１期Ｇｕｉｄｅ　ｏｆＣｈｉｎａＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ　２０１０，Ｖｏ１．８，Ｎｏ．３１　表１　乙型肝炎病毒ＤＮＡ核酸扩增定量检测与酶免标志物检测结果　（　－＋ｓ）　注：１．各组分别与Ａ组比较：　表示Ｐ＜０．０１，　表示Ｐ＜０．０５，ｆ、检验；２．ＤＮＡ对数均值项各组分别与ＨＢｓＡｇ（ｓ／ｃｏ）、ＨＢｅＡｇ（ｓ／ｃｏ）、　ＨＢｅＡｂ（ｓ／ｃｏ）、Ｐｒｅ—Ｓ１（ｓ／ｃｏ）各项各组进行相关性分析：ｒ表示Ｐ＜０．Ｏ１，ｙ表ｆｉ，ｒｐ＜０．０５　ＤＮＡ值＞１　Ｘ　１０　以上组与ＨＢｅＡｇ（ｓ／ｃｏ）、ＨＢｅＡｂ（ｓ／ｃｏ）、Ｐｒｅ－Ｓｌ相　Ｚｒ＞Ｏ．６００，与ＨＢｅＡｂ（ｓ／ｃｏ）呈负相关。　３讨论　３．４由以上实验结果可以得出，仅仅依靠乙型肝炎病毒标志物抗原抗　体的检测，不能准确判断病毒复制的程度及传染性的强弱，也不是体　内病毒的真实反应；可能存在的因试剂方法的局限性、病毒变异等所　致假阴性和假阳性，以及对检测结果的进一步确认和适当的解释　ｑ，　对ＨＢＶ感染血清标志物检测的正确使用有重要意义ＰＣＲ方法动态检测　ＨＢＶ　ＤＮＡ是评价病毒载量，疗效观察的最可靠方法。　３．１乙型肝炎病毒ＨＢｓＡｇ为病毒蛋白质外壳、１９６３年在澳大利亚土著　人血中发现，又称为澳大利亚抗原，ＨＢＶ感染后，大多数感染者外周　血中可出现ＨＢｓＡｇ，它不能直接真实地反应乙型肝炎病毒体内复制和存活病毒情况，有的仅仅就一蛋白外壳，根本就无病毒核酸存在，也　存在体内血液循环中，ＨＢｓＡｇ仅为乙型肝炎病毒感染的标志，不能反　应病毒有无复制、复制程度、传染性强弱及预后，而ＨＢＶ　ＤＮＡ为乙　型肝炎病毒核酸。ＨＢｓＡｇ与ＨＢＶ　ＤＮＡ检测的不一致性可也排除标本　脂血、溶血等的影响　。ＨＢＶ　ＤＮＡ检测与ＨＢｓＡｇ酶免检测不一致性　有两种情况：一是ＨＢｓＡｇ阴性，而ＨＢＶ　ＤＮＡ检测阳性，这种情况可　能是ＨＢｓＡｇ酶免检测灵敏度低的原因造成的；另一种是ＨＢｓＡｇ阳性，　参考文献　［１］　李文丽，蒲荣，陈亚琴．前Ｓ１抗原和ＤＮＡ在ＨＢＶ感染的动态价值　［Ｊ］．中国医疗前沿，２００９（９）：４９－５０．　［２］　张诗颜，谢品金，马雄剑．慢乙肝患者｝玎Ｂ、，．ＤｌＮＡ和Ｐ　ｓｌＡｇ及哪ＶＭ　与肝脏功能的检测意义［Ｊ］．放射免疫学杂志，２００７，２０（２）：８４－８６．　［３］唐中，张国元，凡瞿明等．１２４５例微粒子酶免化学发光分技术检　测乙肝两对半的结果分析［Ｊ］．Ｊｌｌ；ｔｋ医学院学报，２００３，２９（３）：８３－８４．　而ＨＢＶ　ＤＮＡ检测阴性的原因：一是ＨＢＶ　ＤＮＡ含量低，低于ｌ×１０　以　下，二是血中存在的ＨＢｓＡｇ是由ＨＢＶ　ＤＮＡ整合到人染色体与宿主基　因共同表达所致，测不到血清中的ＤＮＡ　】。故ＨＢｓＡｇ阳性血清ＨＢＶ　ＤＮＡ核酸定量检测不一定都＞１×１０　。ＨＢＶ　ＤＮＡ核酸定量检测与酶　免ＨＢｓＡｇ检测无相关性。　［４］　孙南雄，黄祖珊，刘雁雁等．乙型肝炎患者９５７例血清学标志物分　析［Ｊ］．中华检验医学杂志，１９９９，２２（５）：３９－４１．　［５］　周子成，刘重阳，杨建民．不同慢性肝病患者血清中乙型肝炎病　毒ＤＮＡ定量检测及其临床意义［Ｊ】．中华实验和临床病毒学杂　志，１９９８，ｌ２（２）：１２９—１３２．　３．２　ＨＢｅＡｇ为ＨＢｃＡｇ的可容部分，二者有７５％共同的氨基酸序列。　ＨＢｅＡｇ与病毒Ｄａｎｃｅ颗粒、ＨＢＶ　ＤＮＡ具有伴随关系，是ＨＢＶ复制活　跃的血清学指标，所以，ＨＢｅＡｇ项ＨＢＶ　ＤＮＡ高低载量有极显著性差　［６】李娟，王春平，陈佩兰等．４１５例ＨＢＶ感染的不同血清学指标组合　的ＨＢＶ－ＤＮＡ检测［Ｊ］．临床检验杂志，２００１，１７（５）：１４３・１４４．　［７］郑建中，王丽萍．［Ｊ］．中国医药指南，２００８，６（１７）：６５・６７．　异。有文献报道，ＨＢｓＡｇ／ＨＢｅＡｇ／抗一ＨＢｃ阳性模式与ＨＢＶ　ＤＮＡ存在相　关性，ＨＢｅＡｇＩ￣Ｈ性血清ＨＢＶ　ＤＮＡ　ＰＣＲ检测几乎全为阳性，并且大部　［８］　李金明．临床酶免疫测定技术［Ｍ］．北京：人民军医出版社，２００８：　１８７—１９３．　分含量＞１０　【９Ｊ。所以，ＨＢｅＡｇ含量与ＨＢＶ　ＤＮＡ高载量有相关性。　３．３当血清ＨＢｅＡｇ转阴后，可出现ＨＢｅＡｂ，说明病毒复制减少，传染　［９］成军，孙长贵，王国政等．ＨＢｓＡｇ￣Ｎ性血清ＨＢＶ与ＨＢＶ标志物定　量测定的相关性［Ｊ】．国际检验医学杂志，２００７，２８（５）：２６３－２６５．　性减弱，ＨＢｅＡｂ为病情好转的指标，也是乙型肝炎病毒治疗血清学转　型的一个标准。所以ＨＢｅＡｂ与ＨＢＶ　ＤＮＡ负相关。　［１０］李金明．乙型肝炎病毒血清标志物测定及结果解释的若干问题　［Ｊ】．中华检验医学杂志，２００６，２９（５）：６８—７０．　临床研究　化妆品皮肤病临床分析８８例　封爱国　【关键词】化妆品；皮肤病；临床分析　中图分类号：Ｒ７５１　文献标识码：Ｂ　文章编号：１６７１—８１９４（２０１０）３１—００３４—０２　冯秀凤　蒋海霞　常　红　随着人们生活水平的提高，化妆品…的种类和使用日趋增多，化　１资料与方法　１．１一般资料　泰兴市疾病控制中心皮肤病防治院（２２５４００）　妆品皮肤病的发病率也越来越高。笔者对近年来在本中心皮肤病门　诊诊治的８８例化妆品皮肤病患者就发病原因，对其做斑贴试验进行分　析，现将结果报道如下。